Transfekce B-lymfocytů s cizí DNA bez použití virů

Transfekce, čili vkládání cizorodé DNA do lidských i jiných buněk dovoluje studovat expresi genů v laboratoři a také léčit genetické poruchy v genomu.

K transfekci se využívají rozmanité technologie. Funguje to u prakticky všech typů buněk, s výjimkou B-lymfocytů, bílých krvinek zodpovědných za specifickou, tedy protilátkovou imunitu. Do těchto buněk je extrémně obtížné vložit DNA jinak, než s pomocí ochočených virů. Použití virů ale zase zahrnuje mnohé problémy a rizika.

Biomedicínský inženýr Andre Boon-Hwa Choo z institutu A*STAR Bioprocessing Technology Institute a z Národní univerzity Singapuru a jeho tým teď vyvinul novou strategii, jak do nezdolných B-lymfocytů dostat DNA. Využili k tomu technologii sonoporace, díky níž propašovali cizí DNA do B-lymfocytů s vysokou mírou úspěšnosti.

Podle Boon-Hwa Choa je to vůbec poprvé, kdy někomu povedlo zprovoznit stabilní a úspěšnou transfekci B-lymfocytů s postupem, který nezahrnuje viry.

Technologie sonoporace kombinuje působení ultrazvuku a mikrobublinek plynu pro vytvoření dočasných pórů v buněčné membráně B-lymfocytů. Těmito póry se pak vkládaná DNA může dostat do B-lymfocytů. Choo s kolegy vyladili akustickou energii ultrazvuku a koncentraci mikrobublinek, s nimiž se jim povedlo vložit do buněk tří různých linií lidských B-lymfocytů kruhovou DNA. Úspěšné vložení DNA poté potvrdili vizuálně.

Autor: RNDr. Stanislav Mihulka, Ph.D.

Líbil se Vám tento článek? Doporučte jej svým známým.

Více informací najdete zde: