Nový upgrade pro skvělý genomový editor CRISPR/Cas9

Vědci Broad Institute of MIT & Harvard, MIT a NIH-NCBI ve společné studii odhalili velice slibnou Cas9 nukleázu, s jejíž pomocí lze překonat jednu ze zásadních obtíží dosavadního editování genomu živých buněk s genomovým editorem CRISPR/Cas9.

Jejich výsledky, nedávno publikované časopisem Nature by měly významně usnadnit práci s tímto genomovým editorem a přispět k mohutnému rozvoji experimentů s živými buňkami i vývoje terapeutických aplikací.

Genomový editor CRISPR/Cas9 byl původně objeven u bakterií, které ho používají jako šikovný obranný mechanismus proti virům a podobným zlotřilým sekvencím. Vlastní jej mnohé mikroorganismy, ale jen některé typy tohoto editoru jsou vhodné k editaci genomu živých buněk eukaryotních organismů. K editaci genomu eukaryot byla poprvé použita Cas9 nukleáza nechvalně známého původce angín a zánětů středního ucha Streptococcus pyogenes, čili SpCas9 a pak se s editováním genomů roztrhl pytel.

Aby editor CRISPR/Cas9 mohl fungovat, musí se nejdřív jeho klíčové součásti dostat do editované buňky. Obvykle se k tomu používají virové vektory, přičemž jedním z nejslibnějších je vektor založený na viru AAV (Adeno-associated virus). Nevyvolává lidské infekce a v Evropě už povolili jeho používání. Problém je v tom, že má relativně malý prostor pro náklad a je dost obtížné do jedné jeho virové částice naložit Cas9 nukleázu a ostatní nezbytné součásti editoru CRISPR/Cas9.

Badatelé proto genomový editor vylepšili použitím nové Cas9 nukleázy, označené jako SaCas9, která pochází od velmi nechvalně proslulého zlatého stafylokoka Staphylococcus aureus. Opět se ukazuje, že nebezpeční desperáti mají ty nejlepší zbraně. Nukleáza SaCas9 je o 25 procent menší, nežli původně používaná nukleáza SpCas9, a do virových částic viru AAV se vejde mnohem snadněji.

Autor: RNDr. Stanislav Mihulka, Ph.D.

Líbil se Vám tento článek? Doporučte jej svým známým.

Více informací najdete zde: